保健食品中芦荟甙的测定(高效液相色谱法)

来源:中国机械设备网   时间:2019-02-21    浏览量:45

保健食品中芦荟甙的测定(高效液相色谱法)
1.范围
本方法规定了芦荟胶囊、芦荟片剂、芦荟汁等保健食品种芦荟甙含量的测定方法。
本方法适用于芦荟胶囊、芦荟片剂、芦荟汁等保健食品中芦荟甙的测定。
本方法的最低检出量10mg。
本方法的最佳线性范围:0~100µg/mL  y=1124194x+3215:线性关系r=0.9999
2.原理
用甲醇+水(55+45)作为溶剂,提取试样中的芦荟甙,经高效液相色谱仪C18柱分离,紫外检测器293nm条件下检测,以芦荟甙保留时间定性,峰面积定量。
3.试剂
(1)甲醇:色谱纯。
(2)水:重蒸水。
(3)芦荟甙标准品:纯度≥98%。
(4)芦荟甙标准溶液的制备:准确称取芦荟甙标准品10mg,加流动相甲醇+水(55+45)溶解并移入100mL容量瓶中,定容至刻度。
4.仪器设备
(1)501液相色谱仪(UV501紫外检测器),7725I手动进样阀,DT-230A色谱柱温箱,N2000色谱工作站
(2)色谱柱 C18(以十八烷基键合硅胶填料为填充剂)或具同等性能的色谱柱,150mm×6mm,5μm。
(3)超声波清洗器。
(4)C18净化富集柱 C18预柱子装量0.5g,分配型。
(5)离心机3000r/min。
5.色谱分离条件
(1)流动相:甲醇+水55+45。
(2)流速:1mL/min。
(3)柱温:40℃。
(4)检测波长: 293nm。
(5)灵敏度:0.016AUFS。
(6)进样量:10μL。
6.分析步骤
(1)试样制备
    将固体试样粉碎成粉末状,混匀。准确称取上述经处理后的试样1.00g于50mL容量瓶中,加检测用流动相30mL溶解,经超声振提5min加流动相定容50mL,离心沉淀,上清液经滤膜(0.45μm)过滤,芦荟汁饮料直接经0.45μm滤膜过滤。
(2)测定步骤
    分别精密吸取标准溶液和试样溶液10μL注入高效液相色谱仪,依上述色谱条件,以保留时间定性,用外标法计算试样中芦荟甙的含量。
7.计算公式
    A1×C×V
X= —————
     A2×m                        
 式中:
X—试样中芦荟甙含量mg/g(mg/ mL);
A1—试样中芦荟的峰面积;
C—标准溶液浓度,mg/ mL;
A2—标准液中芦荟甙的峰面积;
V—试样定容体积,mL;
m—试样质量,g(mL)
8.允许误差
同一试样两次测定值之差不得超过两次测定平均值的10%。

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